MODIFICACIÓN GENÉTICA DEL GRANULOVIRUS DE Trichoplusia ni CON CRISPR/Cas9
Palabras clave:
Baculovirus, edición, genomaResumen
La mayoría de las proteínas heterólogas expresadas en sistema de baculovirus son obtenidas por
recombinación homóloga de co-transfección en líneas celulares de insectos, sin embargo, estas son
limitadas. El sistema CRISPR/Cas9 ha demostrado alta eficiencia en la edición de secuencias específicas
sin la utilización de líneas celulares de insectos. En la presente investigación se ha editado el genoma de
Trichoplusia ni Granulovirus (TnGV) con el sistema CRISPR/Cas9 y biobalística PIG en larvas de T. ni.
Para ello se diseñaron 1. Un vector de reparación homóloga (pTnGV101) con las regiones orf5 y orf7, y 2.
Los gRNA que flanquean la p10 del TnGV. Con la transformación con biobalística PIG se obtuvo un 40%
de larvas de T. ni infectadas y 38% de esta población expresó la EGFP. Estos resultados demuestran que el
sistema CRISPR/Cas9 y la biobalística PIG en conjunto, pueden ser utilizados con éxito para la
modificación genética de baculovirus in vivo.
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